久久久久欧美精品日韩精品,中文字幕亚洲综合小综合,久久精品国产欧美高清,韩日三级成年人的电影

網(wǎng)站首頁(yè)技術(shù)中心 > 人細(xì)胞角蛋白片段CyK18(TPS)試劑盒說(shuō)明書
產(chǎn)品目錄
人細(xì)胞角蛋白片段CyK18(TPS)試劑盒說(shuō)明書
更新時(shí)間:2016-03-07 點(diǎn)擊量:934

人細(xì)胞角蛋白片段CyK18(TPS)試劑盒說(shuō)明書

本試劑僅供研究使用       目的:本試劑盒用于測(cè)定人血清,血漿及相關(guān)液體樣本中細(xì)胞角蛋白片段CyK18(TPS)的含量。

實(shí)驗(yàn)原理:

   本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人D細(xì)胞角蛋白片段CyK18(TPS)水平。用純化的人細(xì)胞角蛋白片段CyK18(TPS)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入細(xì)胞角蛋白片段CyK18(TPS),再與HRP標(biāo)記的羊抗人抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMBHRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的細(xì)胞角蛋白片段CyK18(TPS)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中人細(xì)胞角蛋白片段CyK18(TPS)濃度。

 

試劑盒組成

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說(shuō)明書

1

1

 

封板膜

2片(48

2片(96

 

密封袋

1個(gè)

1個(gè)

 

酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品:90pg/ml

0.5ml×1

0.5ml×1

2-8℃保存

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液

1.5ml×1

1.5ml×1

2-8℃保存

酶標(biāo)試劑

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

顯色劑A

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

顯色劑B

3 ml×1

6 ml×1

2-8℃保存

終止液

3ml×1

6ml×1

2-8℃保存

濃縮洗滌液

20ml×20倍)×1

20ml×30倍)×1

2-8℃保存

 

樣本處理及要求

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBSPH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBSPH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBSPH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

 

操作步驟:

  1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋與加樣:在酶標(biāo)包被板上設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品孔10孔,在*、第二孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品100μl,然后在*、第二孔中加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為60pg/ml ,40pg/ml20pg/ml,10pg/ml,5pg/ml)。
  2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
  3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
  4. 配液:將3048T20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水3048T20倍)倍稀釋后備用。
  5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
  6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
  7. 溫育:操作同3。
  8. 洗滌:操作同5。
  9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
  10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
  11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。

 

注意事項(xiàng):

  1. 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
  2. 濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
  3. 各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
  4. 請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)zui后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
  5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
  6. 底物請(qǐng)避光保存。
  7. 嚴(yán)格按照說(shuō)明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).
  8. 所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
  9. 本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

10. 如與英文說(shuō)明書有異,以英文說(shuō)明書為準(zhǔn)。

試劑盒性能:

1.樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990以上。

2.批內(nèi)與批見(jiàn)應(yīng)分別小于9%11%

保存條件及有效期:

1.試劑盒保存:;2-8。

2.有效期:6個(gè)月

 

計(jì)算:

以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),   

在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD     

值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋     

倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)     

準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD     

代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋     

倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。

滬公網(wǎng)安備 31011802001677號(hào)

日本一区二区三区乱在线视频-国产精品一区二区精品视频-日本人妻系列在线免费看-国产成人高清三级视频| 亚洲欧美日本成人在线-伦理视频在线观看一区二区三区-日韩精品中文字幕人妻-四虎永久地址在线观看| 久久成人av一区二区三区-人妻一区二区三区久久丰满-日韩在线播放视频不卡-亚洲成熟女人一区二区三区| 五月婷婷丁香综合入口-日本少妇免费中文字幕-96青草视频在线观看-中文字幕成人精品久久不卡| 日本高清不卡一区二区三区-男女国产猛烈无遮挡色-精品九九热在线免费视频-日本一区二区福利在线观看| 午夜性色福利在线视频福利-久久精品视频免费获取地址-亚洲一区二区三区在线观看不卡-无套进入美女免费观看视频| 国产成人精品一区二区日出白浆-亚洲女优大片在线观看-明星换脸av一区二区三区-四虎影院国产精品久久| 亚洲一区日韩精品在线观看-精品人妻少妇一区二区免费蜜桃-国产三区四区五区在线观看-真正国产熟女免费视频| 日本激情内射亚洲精品-国产亚洲一区二区三区午夜-国产精品人妻熟女av在线-亚洲av综合亚洲精品| 高清有码在线观看日本-精品少妇人妻一区av-色综合久久成人综合网-久久久国产精品人妻一区二区三区| 久久女人天堂精品av-韩国中文字幕三级精品久久-国产成人精品日本亚洲i8-免费黄色一级大片91| 在线看片国产福利你懂得-av中文字幕精品一本久久中文字-亚洲一区二区三在线高清真人-日韩在线不卡视频免费看| 99久久亚洲综合精品成人网-国产性感丝袜在线观看-国产一区二区三区激情啪啪啪-久久香蕉综合国产蜜臀av| 熟女国产精品一区二区三-一区二区三区av这些免费观看-精品国产一区二区二三区在线观看-国产精品一品二区三区日韩| 日本激情内射亚洲精品-国产亚洲一区二区三区午夜-国产精品人妻熟女av在线-亚洲av综合亚洲精品| 追虎擒龙国语高清在线观看完整版-色婷婷一区二区三区免费-网友自拍在线视频国产-草草久在线视频在线观看| 亚洲高清无吗视频在线播放-国产亚洲最新在线不卡-久久亚洲国产精品成人-二区三区在线免费观看视频| 午夜福利国产原创精品-久久综合激情日本熟妇-国产熟女50岁一区二区-国产另类视频一区在线| 亚洲综合精品一区二区在线-国产亚洲精品视频在线播放-国产精品经典三级免费观看-五月婷婷六月丁香视频| 黄色大片一级在线观看-蜜臀91精品国产高清在线-色综合久久鬼色综合久久-九九热精品视频在线免费看| 日韩精品人妻久久久一二三-亚洲精品呻吟久久粉嫩av-女同按摩高潮中出亚洲-亚洲成人精品福利在线| 91国产自拍视频在线-久久综合婷婷伊人五月天-国产日韩一区二区三区高清视频-日本电影一区二区5566| 爆操美女屁股在线观看免费-亚洲国产成人久久综合-亚洲一区二区免费中文麻豆-青青青青草原在线观看| 午夜精品久久内射电影-亚洲精品自拍视频免费在线-国产免费观看久久黄av麻豆-麻豆国产精品伦理视频| 国产精品一区二区在线观看免费-日本老熟妇色视频免费-亚洲码国产精品高潮在线-日韩一区二区三区日韩| 91精品在线播放黑丝后入-97免费在线播放视频-av网站天堂网国产av-亚洲熟妇乱色一区二区三区| 久草免费福利在线播放-女同女同恋久久级三级-亚洲中文字母在线播放-91精品国产麻豆国产自产在| 日韩av不卡一区二区-国产白丝精品91久久-午夜福利理论片在线播放-国产粉饼哪个牌子好用| 国产成人一区二区免费av-国产成人精品一区二区不卡-亚洲乱码精品一区二区在线-青草视频免费在线观看尤物| 国产一区二区三区四区在线播放-国语精品国内自产视频-可以免费看黄的网久久-久久久亚洲av三吉彩花| 99久久久国产精品视频-亚洲最大的福利视频网站-日韩人妻精品一区二区在线-中文字幕乱码精品在线观看| 少妇裸淫交视频免费看-欧美日韩中文字幕第一页-91精品看黄网站在线观看-国产精品一区二区三区色噜噜| 国产精品一区二区白浆视频-网红厕所天天干夜夜操a-日韩殴美精品一区二区-国产成人一区二区三区精品| 国产免费午夜精品福利视频-久热99精品免费视频-久久久免费精品国产色夜-亚洲黄色不卡在线观看| 免费十八禁一区二区三区-国产精品一区二区三区99-在线一区二区三区男男视频观看-精品欧美一区二区三区人妖| 色男人天堂综合久久av-蜜桃精品一区二区三区蜜桃臀-国产粉嫩高中生第一次不戴套-成人激情自拍视频在线观看| 国产一区二区精品在线播放-亚洲欧美精品伊人久久-亚洲精品日韩在线播放-国产精品色av一区二区三区| 中文字幕亚洲天堂第一页-国产午夜福利在线视频-亚洲精品中文字幕女同-亚日韩精品一区二区三区| 成年深夜在线观看视频-成人国产av精品在线-av乱亚洲一区二区三区-亚洲精品综合一区二区在线| 亚洲av男人的天堂久久精品-人妻中文字幕一区二区视频-国产男女乱淫真视频播放-国内人妻自拍交换在线视频| 久久久精品国产亚洲av高清涩受-国产精品一区二区三区成人-欧美日韩国产精品视频一区二区三区-大陆美女阴户特写毛片|